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牛血清白蛋白(BSA)在生化实验中的作用

发布时间:2022-06-08 10:44:19 来源:艾尚体育网页 作者:艾尚体育首页    

  牛血清白蛋白(BSA)在生化实验中有广泛的应用, 例如在WB实验中加入BSA, 通过提高溶液中蛋白质的浓度,对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附,能减轻有些酶的变性,减轻不利环境因素如加热,表面张力及化学因素引起的变性的。

  按50:1配置BCA工作液。10ulC液(蛋白标准)+90ulPBS液稀释成0.5mg/ml的蛋白标准液。再分别以0、1、2、4、8、12、16、20ul将蛋白标准液加入96孔板的第1~8标准孔中,在其他样品孔中加入10ul待测样品。分别加PBS定容至20ul。各孔中加入200ulBCA工作液,室温放置2小时。用酶标仪测定蛋白浓度:测定A562,依标准曲线算出蛋白浓度。

  1 制 胶: 按比例配制分离胶,缓缓地摇动溶液,使激活剂混合均匀,将凝胶溶液平缓地注入两层玻璃J中,再在液面上小心注入一层水,以阻止氧气进入凝胶溶液中,静置40min。同前按比例配制浓缩胶,但混匀溶液时不要过于剧烈以免引入过多地氧气。吸去不连续系统中下层分离胶上的水分,连续平稳的注入凝胶溶液,然后小心插入梳子并注意不得在齿尖留有气泡,静制60min以上以保证完全聚合。

  2 预电泳: 将聚合好的凝胶安置于电泳槽中,小心拔去梳子,加入电泳缓冲液后低电压10-20V的预电泳20-30min。(目的是清除凝胶内的杂质, 疏通凝胶孔径以保证电泳过程中电泳的畅通)。

  3 样品准备:首先计算上样体积,然后按样品:上样buffer=4:1的比例加入上样bufer混匀,沸水10分钟,冰上5分钟。

  4 加 样: 预电泳后依次加入标准品(Marker)和待分析样品。(加样时间要尽量短,以免样品扩散,可在未加样的孔中加入等量的样品缓冲液避免边缘效应。每个泳道加5ul 。

  5 电 泳: 加样完毕,选择80V恒压进行电泳,电泳直至溴酚蓝染料前沿到达两胶交界处(一般约20分钟),更换至100V恒压电泳,电泳直至溴酚蓝染料前沿下至凝胶末端处,即停止电泳(一般约为1小时20分钟)。

  艾美捷牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用,例如在western blot中作为封闭试剂.血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用.在动物细胞无血清培养中,添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。

  艾美捷牛血清白蛋白粉末,热处理,诊断级是以USDA认证的牛源血浆作为原料,使用砖利的热处理方法灭活蛋白酶并经过进一步的非溶液步骤去除脂肪和其它血浆蛋白.诊断级牛血清白蛋白粉末是专门用于减少可能会产生背景干扰以及细胞培养体系抑制等因素,该牛血清白蛋白不含蛋白酶,不含或具有很低活性的内毒素、生物负载以及IgG等。

  另外,该诊断级牛血清白蛋白可用于蛋白标准品、稀释剂、偶联物或者酶稳定剂,也可以应用于高灵敏度的免疫分析实验、细胞培养以及杂交实验等.另有5kg以及10kg等更大规格包装,是目前较高质量的牛血清白蛋白(BSA)科研用品。返回搜狐,查看更多

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